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黄色荧光蛋白

作为一种光谱型，我们黄色荧光蛋白已经被开发成亮度最亮及最通用的遗传编码探针。然而最早的变体EYFP（表6）虽然仍被广泛应用，但是我们还是有一些短处使得应用比较不理想。我们之中有单体形式的变体柠檬黄（mCitrine）和维纳斯（mVenus），他们俩是目前应用最多的黄色荧光蛋白探针，但都还没有商业化。

但不要觉得我么一无是处哦，我们还有另一种很有应用潜力的黄色荧光蛋白是能量转移黄色荧光蛋白（yellow fluorescent protein for energy transfer, YPet），它经合成的DNA重排获得的。YPet是已经开发的亮度最强的黄色荧光蛋白，并且有很好的光稳。YPet对酸性环境的耐受性比较强。所以我们家族都很希望他有一天出人头地争光呢。

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橙色荧光蛋白

与数以百计的蓝绿色、绿色及黄色光谱型荧光蛋白相比，我们家族和红色家族一样就算是一个很小的家族啦，在橙色和红色波长（约560nm到650nm）光谱区仅仅开发了几种探针。现有的这几个可爱的小成员都是从珊瑚中分离得到的，并且在多种成像情景中显现出应用潜力，但其实我们是一个新兴家族呢，所以其实我们给自己的成员取名字的时候还是比较混乱的。通常被命名为红色荧光蛋白RFP的探针如DsRed、TagRFP及tdTomato，实际上具有明显的橙色多于红色的发射谱。下面就说一说咱们这个小家族里面比较骄傲的代表好啦，他的名字是Kusabira Orange，是来源于香菇珊瑚Fungia concinna的四聚体。他很努力很争气，表现出与EGFP相似的亮度，并且在更广泛的荧光发射范围都具有光稳定性，是所有荧光蛋白中最好的，所以它是长期成像实验中的最佳选择。现在Kusabira Orange的四聚体和单体变体都已经商业化了！最近，我们家族还新添了一位小成员呢，他是一种新的高亮度的单体橙色蛋白TagRFP，在定位研究和FRET研究中是很有希望的候选物。最早是从海葵Entacmaea quadricolor中克隆到其二聚体形式，随后的随机突变产生一种快速成熟变体TurboRFP，其特点是光稳定性高、亮度强、pH耐受性高等。我们家族还有一种在所有光谱型中亮度最强的荧光蛋白，他就是串联形式的二聚体Tomato（dimeric Tomato, dTomato）。它是一种原始的水果蛋白的橙色衍生物。哈哈其实这么说来我们家族虽然小但是我们还是有很多潜力股哦，期待我们更好的发展吧！

啦啦啦爆两张照片给你们瞧瞧

蓝色和蓝绿色荧光蛋白

首先来介绍一下我自己吧，我叫做蓝色荧光蛋白（我的英文名缩写叫做BFP，全称嘛，就是Blue Fluorescent Protein啦），我的兄弟叫做蓝绿色荧光蛋白，也有人叫他青色荧光蛋白，他的英文名字是Cyan Fluorescent Protein，你们都那么聪明，自然知道缩写就是CFP啦。

我们的前身就是GFP，我们的老大，父辈。之所以这么说是因为我们可都是从他那里基因突变来的呢。我们兄弟俩最受关注的潜力就是我们在成像中的应用潜力哦！我们还上过报纸呢，不信你看。

有报道指出，改进的蓝色Aequorea荧光蛋白变体与EBFP相比，亮度和光敏感性有明显增强。这些新的变体被命名为Azurite（石青或蓝铜矿）、强力增强型蓝色荧光蛋白2（strongly enhanced blue fluorescent protein 2, SBFP2）及EBFP2，他们第一次使得活细胞在蓝色光谱区域成功地长时间成像成为可能。厉害吧！

我们这个蓝绿光谱区域（约470nm~500nm）本来一直是原始的Aequorea ECFP衍生物占优势，直到后来有一个后辈出现了，可以说他真是青出于蓝胜于蓝哈哈，他就是单体的水鸭色（又称水鸭蓝，是蓝色与绿色正中的颜色）变体mTFP1。相比我们这些前辈，他荧光蛋白亮度更强，具有酸不敏感性，而且光稳定性更强。我们的都很替他开心呢~

EBFP2写真~

这就是那个水鸭色的后辈啦！

红色荧光蛋白

在活细胞及动物全身成像中需要表现较好的红色荧光蛋白，主要是由于在多种颜色成像实验中需要红色探针，另外基于较长的激发波长产生的光毒性较小，可以用来探测较深的生物组织。所以这个时候就需要我们这个家族大显身手啦。我们家族的命名来由是这样子的，通过mRFP1（团残基的直接突变产生的新的荧光蛋白，并以相应的水果名字来命名。

这其中mStrawberry和mCherry（也就是上面的那幅图啦），发亮度分别为EGFP的75%和50%左右。mCherry的光稳定性要远强于mStrawberry，所以长期成为成像实验中mRFP1最好的替代品。我们和橙色家族合作，共同填补了水母红移荧光蛋白（如YPet）与大量低聚红色珊瑚荧光蛋白间的空白，并且目前已经商业化。虽然，我们家族里面某些荧光蛋白缺乏许多成像实验所需要的亮度和光稳定性，但是我们存在我们就相信，最终可以找到跨越整个可见光谱的亮度高、稳定性强的单体探针。为我们加油啦！

我们家族里面还有真正的远红外基因工程探针哦。其中最有应用潜力的是mPlum（快看上面的图就是她！），虽然其亮度有限仅为EGFP的10%，但她有极好的光稳定性。mPlum可与蓝绿色、绿色、黄色及橙色家族的成员一起应用于多色成像实验，是不是很棒！

我们家族里面还有一位叫做Katushka的，他生于2007年，但是已经很有名气啦。虽然亮度仅为EGFP的三分之二，但Katushka是650-800nm光谱区亮度最强的荧光蛋白，此区域对较深的组织成像非常重要。mKate的光稳定性是个例外，其亮度与mCherry类似，这使得它成为在远红外光谱区成像的定位实验中极好的选择。